MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG
Chai cấy máu hai pha được dùng để thực hiện xét nghiệm cấy máu tìm tác nhân gây nhiễm khuẩn huyết.
NGUYÊN TẮC
Cấy máu là một trong những quy trình quan trọng và then chốt trong phòng xét nghiệm vi sinh, vì máu thường được vô trùng nên việc phân lập và xác định vi sinh vật có ý nghĩa chuẩn đoán rất lớn. Hệ thống 2 pha giúp khúm khuẩn dễ dàng mọc và tách rời giúp dễ quan sát khuẩn lạc phân lập trên thạch. Khuẩn lạc được phân lập có thể sử dụng để kiểm tra tính nhạy cảm kháng sinh và định danh. Tránh ngoại nhiễm: không cần mở nắp chai khi cấy máu; Cấy truyền ngay trong chai cấy máu từ pha lỏng qua pha đặc. Được sản xuất từ môi trường BHI nên các vi khuẩn khó mọc như N. meningitidis, H. influenzae, S. pneumoniae… vẫn mọc dễ dàng. SPS với công dụng: kháng đông làm cho vi khuẩn không bị bẫy trong cục máu đông, ức chế thực bào, ức chế tác động của các kháng sinh aminoglycosides.x
HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG
1. Kiểm tra xem chai có bị nhiễm bẩn hoặc vỡ không.
2. Chuẩn bị và dán nhãn thích hợp.
3. Tháo rời phần nắp che khỏi nắp vặn (không vặn mở nắp).
4. Khử trùng phần nắp vặn bằng cồn 70% rồi chờ khô.
5. Lấy khoảng 5 – 10ml máu bằng kim tiêm, chọc tiêm qua nắp cao su, bơm máu vào pha lỏng bằng các thao tác vô trùng.
6. Sau khi cấy nghiêng chai vài lần và tráng qua mặt môi trường pha đặc.
7. Ủ 35-37°C/18 – 24 giờ.
8. Quan sát trên pha đặc xem có vi khuẩn mọc thành khúm khuẩn hay không. Nếu có, mở nắp cao su và dùng vòng cấy vô khuẩn lấy trực tiếp khúm khuẩn làm kháng sinh đồ và định danh.
9. Nếu trên pha đặc không có vi khuẩn mọc, quan sát trên pha lỏng có vi khuẩn mọc hay không. Dấu hiệu vi khuẩn mọc trên pha lỏng. Nếu có dùng kim tiêm vô trùng lấy 1mL huyền dịch từ pha lỏng thực hiện soi nhuộm Gram, nuôi cấy phân lập và kháng sinh đồ trực tiếp từ pha lỏng. Nếu trên pha lỏng không có vi khuẩn mọc, tráng đều từ pha lỏng sang pha đặc và tiếp tục nuôi ủ 35 – 37oC.
10. Hàng ngày quan sát trên pha đặc và pha lỏng. Nếu có bất kỳ dấu hiệu vi khuẩnmọc thì tiến hành soi nhuộm Gram, nuôi cấy phân lập. Nếu không có dấu hiệu vi khuẩn mọc thì tráng đều từ pha lỏng sang pha đặc và tiếp tục nuôi ủ 35 – 37°C. Đến ngày thứ 6 hoặc thứ 7, quan sát trên trên pha đặc và pha lỏng có vi khuẩn mọc hay không. Nếu không có thì trả lời kết quả cấy máu âm nghiệm (không tìm thấy vi khuẩn gây bệnh).
*Không có thì trả lời kết quả cấy máu âm tính (không tìm thấy vi khuẩn gây bệnh)
TIÊU CHUẨN KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG
· Quan sát bằng mắt thường các chỉ tiêu sau: | · Độ vô trùng: |
– Độ đồng nhất: môi trường đồng nhất về màu sắc, không lợn cợn, không tách lớp. | – Ủ chai môi trường 35-370C/12-24 giờ. |
– Màu sắc: cả pha đặc và pha lỏng có màu vàng nhạt. | – Môi trường đạt chất lượng khi không có vi khuẩn, vi nấm mọc. |