BacterPlate™ GC Agar có IsoVitalex

HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG

• Để các đĩa và khoanh kháng sinh ổn định tại nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.
• Tạo huyền dịch vi khuẩn:
• Lựa chọn khuẩn lạc riêng rẽ từ đĩa thạch đã nuôi trong 18 – 24 giờ (sử dụng môi trường không chọn lọc), tiến hành hòa tan vi sinh vật vào nước muối sinh lý. Điều chỉnh độ đục của dịch huyền dịch đạt độ đục chuẩn 0,5 Mc Farland.
• Trong vòng 15 phút sau khi chuẩn bị huyền dịch. Nhúng tăm bông vô trùng vào huyền dịch mẫu, ép nhẹ và xoay theo chiều cao của ống ở trên mức chất lỏng, để loại bỏ chất lỏng dư thừa thấm vào tăm bông.
• Cấy ria đều tăm bông lên trên toàn bộ bề mặt của đĩa thạch, sau đó xoay mặt đĩa thạch 60^o cho chiều cấy thứ 2 và 3.
• Để đĩa thạch khô tự nhiên trong tủ cấy ít nhất 3 phút và không được quá 15 phút nhằm mục đích để chủng cấy hấp thụ vào bề mặt thạch trước khi đặt các khoanh kháng sinh.
• Dùng pank kẹp đặt các khoanh kháng sinh riêng rẽ đặt lên bề mặt đĩa thạch.
• Không đặt quá 5 khoanh trên một đĩa thạch đường kính 90 mm. Không nên xê dịch hoặc đặt lại vị trí của các khoanh kháng sinh bởi vì tác dụng khuếch tán của kháng sinh gần như là ngay lập tức. Dùng que cấy vô trùng ấn nhẹ khoanh kháng sinh để đảm bảo chúng tiếp xúc hoàn toàn với bề mặt thạch.
• Trong vòng 15 phút sau khi đặt khoanh kháng sinh, mang đĩa thạch nuôi ủ với điều kiện từ 35 – 37 ^oC trong 20 – 24 giờ, 5% CO₂ (không vượt quá 37 ^oC). Lật ngược đĩa khi nuôi ủ.

Tham khảo CLSI M45 đối với thời gian nuôi ủ, nhiệt độ và khí trường đối với các vi khuẩn khó mọc.

ĐỌC KẾT QUẢ

• Sau khi ủ theo thời gian yêu cầu, quan sát khuẩn lạc phát triển trên bề mặt đĩa và các vòng ức chế tròn, đồng nhất xung quanh các khoanh kháng sinh
• Để định danh của vi khuẩn phân lập được phải được tiến hành tiếp theo bởi các thử nghiệm thích hợp. Nếu các khuẩn lạc riêng rẽ còn xuất hiện thì cần phải thực hiện kiểm tra lại.
• Mở nắp đĩa thạch, soi nhìn bề mặt của đĩa thạch dưới ánh sáng phản chiếu, sử dụng thước kẹp chia vạch tới milimet để đo đường kính các vòng ức chế hoàn chỉnh (bao gồm cả khoanh kháng sinh). Đường viền của vòng ức chế nên được đọc từ khu vực mà không phát hiện được sự phát triển của vi khuẩn bằng mắt thường. Các vi khuẩn có khuẩn lạc mờ nhạt hoặc khuẩn lạc bé tại viền của vòng ức chế sinh trưởng chỉ có thể nhìn được khi phóng đại thì nên bỏ qua.
• Để giải thích cho vùng ức chế, tham khảo CLSI M100 cho mỗi chủng vi sinh vật.