BacterStain™ Dung dịch Auramine

• Đối với Đờm:
  • Chuẩn bị mẫu: Sử dụng một que lấy một phần có mủ của đờm (bao gồm bất kỳ chất bã màu vàng nào) và chuyển lên một phiến kính hiển vi để tạo một phết mỏng. Diện tích vết bôi khuyến nghị là khoảng ½ x 1 inch (hoặc 2 cm²).
  • Tạo vết bôi: Dùng chuyển động tròn để trải đều mẫu trên phiến kính. Đảm bảo độ dày của vết bôi phù hợp. Các vết bôi quá dày có thể bong ra trong quá trình nhuộm và khó tẩy màu, trong khi vết bôi quá mỏng có thể không chứa đủ mẫu.
  • Làm khô mẫu: Để mẫu khô tự nhiên trong không khí trước khi tiếp tục.
• Đối với Nước Tiểu:
  • Chuẩn bị mẫu: Tạo một vết bẩn từ ba cặn nước tiểu buổi sáng sớm đã được ly tâm. Sau khi phết mẫu, để khô tự nhiên.
  • Cố định bằng nhiệt: Cố định vết bẩn bằng cách sử dụng máy hâm nóng trượt điện, đây là phương pháp được khuyến nghị. Nếu không có máy hâm, có thể sử dụng phương pháp thay thế: đưa phiến kính đã khô (mặt có vết bẩn hướng lên trên) qua ngọn lửa đầu đốt màu xanh 2-3 lần.
• Nhuộm:
  • Nhuộm bằng Rhodamine-Auramine: Đặt phiến kính cố định vào giá và làm ngập mẫu bằng dung dịch rhodamine-auramine trong 15 phút. Đảm bảo mẫu không bị khô trong suốt quá trình.
  • Loại bỏ dư thừa màu: Sau khi nhuộm, sử dụng nước cất để rửa sạch vết đổi màu.
  • Khử màu huỳnh quang: Trong 2-3 phút, làm ngập lam kính bằng dung dịch axit-cồn (chất khử màu huỳnh quang).
  • Tráng kỹ: Rửa lại bằng nước cất để loại bỏ dư lượng axit-cồn.
  • Nhuộm với thuốc tím: Ngâm mẫu trong dung dịch thuốc tím trong 3-4 phút, không để phiến kính bị khô.
  • Rửa và làm khô: Rửa lại bằng nước cất và để mẫu khô tự nhiên.
• Quan sát dưới kính hiển vi: Kiểm tra mẫu dưới kính hiển vi huỳnh quang, sử dụng bộ lọc kích thích K530 và bộ lọc rào cản BG 12, hoặc bộ lọc kích thích G-365 và bộ lọc rào cản LP 420. Mẫu có thể được kiểm tra ở độ phóng đại cao (400X) và xác nhận bằng cách ngâm trong dầu.

ĐỌC KẾT QUẢ

• Kiểm tra dương tính: Các vi sinh vật kháng axit phát sáng màu đỏ cam trên nền đen.
• Kiểm tra âm tính: Các sinh vật không bền với axit sẽ không phát huỳnh quang hoặc có thể có màu vàng nhạt, trái ngược hoàn toàn với các sinh vật sáng và bền với axit.