BacterPlate™ Muller Hinton Chocolate Agar (MHCA)

Môi trường sẵn sàng sử dụng trên đĩa 90mm để kiểm tra độ nhạy kháng sinh hoặc giấy MIC trên các vi sinh vật khó nuôi cấy
Code: 05040
Quy cách: 10 đĩa/ hộp hoặc theo yêu cầu của khách hàng.
Bảo quản lưu trữ: 2 – 8°C.
Vận chuyển: Nhiệt độ môi trường.
Hạn sử dụng: 03 tháng kể từ ngày sản xuất.

MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG

BacterPlate™ Muller Hinton Chocolate Agar (MHCA) được sử dụng để kiểm tra độ nhạy kháng sinh hoặc kiểm tra giấy MIC trên các vi sinh vật khó nuôi. Thành phần điển hình của môi trường đáp ứng theo tiêu chuẩn NF U47-106 và NF U47-107.
Bao gói bằng màng bán thấm Cellophane film giúp cân bằng độ ẩm môi trường trong quá trình bảo quản.

NGUYÊN TẮC

Việc lựa chọn thành phần của môi trường được thiết kế để đảm bảo lượng thymine và thymidine rất thấp, vì đây là những chất có thể làm giảm hiệu quả của trimethoprim (một loại kháng sinh). Đồng thời, lượng para-aminobenzoic acid (PABA) và các chất tương tự cấu trúc của nó cũng được giữ ở mức rất thấp, vì chúng có thể cản trở tác dụng của sulfonamid.
Do canxi và magie ảnh hưởng đến khả năng nhạy cảm của vi khuẩn Pseudomonas với aminoglycoside, Reller và cộng sự đã đề xuất giới hạn nồng độ các ion này như sau:
- Canxi: 50 – 100 mg/ lít
- Magie: 20 – 35 mg/ lít
Phương pháp Kirby-Bauer được thực hiện bằng cách sử dụng các đĩa giấy nhỏ, đã được thấm kháng sinh và làm khô trước, sau đó đặt lên bề mặt môi trường agar. Khi đặt lên agar, đĩa giấy hút nước từ môi trường và làm kháng sinh tan ra, khuếch tán dần vào môi trường. Kết quả là, xung quanh mỗi đĩa hình thành một vùng nồng độ kháng sinh giảm dần.
Trong khi kháng sinh khuếch tán, vi khuẩn trên bề mặt agar cũng bắt đầu phát triển. Ở những nơi nồng độ kháng sinh đủ thấp, vi khuẩn tiếp tục nhân lên và tạo thành mảng khuẩn lạc có thể nhìn thấy. Tuy nhiên, ở những vùng nồng độ kháng sinh đủ cao để ngăn chặn sự phát triển, sẽ không có vi khuẩn xuất hiện, tạo thành một vùng ức chế (vùng không có vi khuẩn) xung quanh đĩa giấy.
Kích thước của vùng ức chế này được đo để đánh giá độ nhạy cảm của vi khuẩn. Đường kính vùng ức chế càng lớn, vi khuẩn càng nhạy với kháng sinh. Kết quả này được so sánh với bảng tiêu chuẩn để xác định vi khuẩn có nhạy cảm hay kháng với kháng sinh được thử nghiệm.

Kiểm tra Độ nhạy Kháng sinh (Phương pháp Tiêu chuẩn Kirby-Bauer)

Sử dụng một giống vi khuẩn thuần khiết từ môi trường BacterTube^TM Tryptone Soy Broth (TSB) với độ đục tương đương với độ mờ chuẩn của dung dịch bari sulfat (0,5 theo thang McFarland).
Thu thập mẫu vi khuẩn bằng một que cấy vô trùng.
Cấy lên thạch agar bằng cách vạch que cấy 2 – 3 lần trên toàn bộ bề mặt thạch agar để phân phối mẫu vi khuẩn đồng đều.
Để đĩa thạch agar khô trong 10 phút trước khi đặt các đĩa kháng sinh.
Đặt các đĩa kháng sinh lên thạch agar với một lực nhẹ để đảm bảo chúng dính chắc trên bề mặt thạch. Các đĩa kháng sinh nên được đặt cách ít nhất 15 mm từ viền đĩa và có khoảng cách đủ xa để không gây chồng lấn các vùng ức chế.
Nuôi cấy ở 37°C trong khoảng 18 đến 24 giờ.

CHÚ Ý:

Phương pháp Kirby-Bauer được công nhận là phương pháp đáng tin cậy và có thể tái tạo tốt nhất. Tuy nhiên, các phương pháp khác cũng có thể được sử dụng, miễn là các thủ tục chuẩn bị mẫu giống vi khuẩn và cấy giống vi khuẩn đã được nghiên cứu và chuẩn hóa đầy đủ trước đó.

ĐỌC KẾT QUẢ

Đo kích thước các vùng ức chế.
Tham khảo bảng diễn giải kích thước vùng ức chế được cung cấp bởi nhà sản xuất đĩa kháng sinh để xác định mối tương quan giữa vùng ức chế và nồng độ ức chế tối thiểu (M.I.C.).

BacterLab đảm bảo chất lượng của mỗi lô sản phẩm bằng cách kiểm tra với các chủng chuẩn ATCC.

Chủng chuẩn vi sinh vật	Điều kiện nuôi cấy	Kết quả mong đợi
H. pylori ATCC 43504	3 – 5 ngày 35^oC, 5 – 10% CO₂	Mọc tốt, kích thước vùng ức chế theo tiêu chuẩn CLSI
H. influenzae ATCC 33533	18 – 24 giờ, 35^oC, 5 – 10% CO₂
N. meningitidis ATCC 13090	18 – 24 giờ, 35^oC, 5 – 10% CO₂

Trong 1L môi trường (tham khảo)

Acid hydrolysate of casein	17,5 g
Meat extract	2,0 g
Soluble starch	1,5 g
Defibrinated horse blood	50 – 70 mL
Agar	17,0 g

pH của môi trường hoàn chỉnh ở 25°C: 7,3 ± 0,2

Lưu ý: thành phần này mang tính chất tham khảo ngoài ra công ty chúng tôi sẽ pha chế thành phần theo yêu cầu hoặc theo hồ sơ thầu.

Tên sản phẩm	Mã sản phẩm	Quy cách
BacterPlate™ Muller Hinton Chocolate Agar (MHCA)	05040	10 đĩa/ hộp hoặc theo yêu cầu của khách hàng