BacterStain™ Alkaline Methylene Blue

Thuốc thử được sử dụng trong chuẩn đoán lâm sàng các mẫu bệnh phẩm từ người và phục vụ cho mục đích nghiên cứu vi khuẩn học, mô học từ mẫu vật có nguồn gốc từ người.
Code: 04006
Quy cách: 100mL/chai hoặc theo yêu cầu của khách hàng.
Bảo quản lưu trữ: 18 – 25°C.
Vận chuyển: Nhiệt độ môi trường.
Hạn sử dụng: 24 tháng kể từ ngày sản xuất.

MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG

BacterStrain™ Methylene blue được sử dụng trong nhuộm tế bào và nghiên cứu vi sinh vật.

NGUYÊN TẮC

BacterStain™ Methylene blue hoạt động như một thuốc nhuộm đối kháng trong phương pháp Ziehl Neelsen. Sau khi vi khuẩn được nhuộm bằng Carbon Fuchsin và rửa với acid alcohol, các vi khuẩn kháng acid – cồn giữ lại màu đỏ, trong khi vi khuẩn không kháng acid – cồn mất màu và được nhuộm lại bằng Methylene blue, cho màu xanh dương. Methylene blue không bị ảnh hưởng bởi quá trình decolorization, giúp phân biệt giữa các vi khuẩn kháng và không kháng acid – cồn.

Sử dụng trong bộ thuốc nhuộm Ziehl Neelsen

Chuẩn bị tiêu bản:
- Chuẩn bị lam kính sạch, không xước, ngâm vào ethanol 95%, làm khô, sau đó hơ qua ngọn lửa.
- Dán nhãn cho lam kính và đánh dấu vị trí phết bệnh phẩm ở mặt dưới của lam kính.
- Lấy mẫu bệnh phẩm (như đàm, dịch, mô) hoặc khuẩn lạc từ nuôi cấy, ly tâm để thu cặn.
- Sử dụng que cấy vô trùng lấy một vòng ăng (3mm đường kính) hoặc nhỏ một giọt bệnh phẩm lên lam kính. Để lam kính tự khô và cố định bằng nhiệt nhẹ.
Cố định tiêu bản: Để lam kính tự khô trong tủ an toàn sinh học hoặc làm khô ở 60°C.
Nhuộm:
- Phủ thuốc nhuộm BacterStain™ Carbon Fuchsin (Mã: 04004) lên lam kính và hơ 2-3 lần cho đến khi có hơi bay lên (KHÔNG để thuốc nhuộm sôi hoặc khô trên lam kính), để lam kính tự nguội trong 5 phút.
- Rửa nhẹ bằng nước.
- Áp dụng nhiều lần dung dịch BacterStain™ Alcohol acid (Mã: 04009) cho đến khi không còn màu chảy ra từ mẫu.
- Rửa sạch bằng nước và nhuộm đối chiếu với BacterStain™ Methylene blue (Mã: 04006) trong khoảng 1 – 2 phút.
- Tẩy màu bằng dung dịch acid alcohol, rửa kỹ.
- Nhuộm với dung dịch Methylene blue trong 1-2 phút, rửa sạch.
Rửa lại bằng nước, để ráo cho đến khi khô.
Quan sát dưới kính hiển vi, sử dụng vật kính dầu..

ĐỌC KẾT QUẢ

Mycobacterria: màu đỏ/ hồng.
Canh trường còn lại: màu xanh dương
Hình thái AFB từ bệnh phẩm: AFB có hình que mảnh, hơi cong, bắt màu đỏ, đứng riêng biệt hay xếp thành từng cụm, dễ nhận biết trên nền xanh.

BacterLab kiểm tra chất lượng mỗi lô sản phẩm

Chủng chuẩn	Điều kiện	Kết quả
Tiêu bản dương	Vật kính 100X	AFB bắt màu đỏ trên nền xanh sáng, không thấy cặn thuốc nhuộm
Tiêu bản âm	Vật kính 100X	Không thấy AFB