BacterTube™ Methyl Red-Voges Proskauer (MR-VP)

Môi trường thử nghiệm dùng để nhận diện các thành viên của họ Enterobacteriaceae.
Code: 08033
Quy cách:50 ống/ hộp hoặc theo yêu cầu của khách hàng.
Bảo quản lưu trữ: 2 – 8°C.
Vận chuyển: Nhiệt độ môi trường.
Hạn sử dụng: 06 tháng kể từ ngày sản xuất.

MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG

BacterTube™ Methyl Red-Voges Proskauer (MR-VP) được khuyến nghị sử dụng trong các xét nghiệm Voges-Proskauer và Methyl Red, hỗ trợ trong việc nhận diện các trực khuẩn gram âm đường ruột.

NGUYÊN TẮC

Voges-Proskauer (VP) Test
- Một số vi khuẩn sản xuất các sản phẩm kết thúc phản ứng trung tính khi nuôi cấy trong môi trường đặc biệt. Các vi khuẩn đường ruột đặc biệt, khi lên men glucose, sẽ tiếp tục chuyển hóa axit pyruvic để tạo thành acetyl-methyl carbinol (acetoin). Sản phẩm này, trong sự có mặt của oxy trong không khí và 40% kali hydroxide, sẽ chuyển hóa thành diacetyl. Diacetyl, dưới tác dụng xúc tác của alpha-naphthol và creatine, sẽ tạo thành một phức hợp màu đỏ. Đây là phản ứng dương tính trong xét nghiệm Voges-Proskauer (VP). Xét nghiệm VP chủ yếu được sử dụng để phân biệt Escherichia coli (VP – âm tính) với nhóm Klebsiella – Enterobacter (VP – dương tính).
Methyl Red (MR) Test
- Xét nghiệm Methyl Red (MR) dựa trên việc sử dụng methyl red, một chỉ thị pH, để phát hiện độ axit khi một vi sinh vật lên men glucose. Vì tất cả các vi khuẩn thuộc họ Enterobacteriaceae đều lên men glucose, các sản phẩm chuyển hóa axit ban đầu sẽ được hình thành. Tuy nhiên, sau khi ủ thêm (2 – 5 ngày), các vi khuẩn MR-dương tính sẽ tiếp tục sản xuất thêm axit. Độ axit tăng lên sẽ vượt qua khả năng đệm của phosphate, dẫn đến pH giảm và phát triển màu đỏ.
- Các vi khuẩn MR-âm tính, như Klebsiella pneumoniae và Enterobacter aerogenes, tiếp tục chuyển hóa các sản phẩm lên men bằng quá trình decarboxyl hóa. Kết quả là phản ứng kiềm (không có màu đỏ) do sự sản xuất acetoin trung hòa pH, dẫn đến không phát triển màu đỏ

Trước khi cấy, để môi trường về nhiệt độ phòng.
Sử dụng chủng thuần khiết đã được nuôi cấy trong 18 – 24 giờ, cấy nhẹ vào môi trường.
Ủ ở điều kiện hiếu khí ở 35ºC, trong 24 giờ.
Sau 24 giờ ủ, lấy 1mL môi trường lỏng cho vào một ống nghiệm sạch
Sau đó để phần môi trường còn lại ủ thêm 24 giờ.

Xét nghiệm Voges-Proskauer
- Thêm 0,6mL dung dịch alpha-naphthol 5% vào mẫu đã lấy. Sau đó, thêm 0,2mL dung dịch KOH 40%.
- Lắc nhẹ ống nghiệm để tiếp xúc với oxy trong không khí.
- Để ống nghiệm đứng yên trong 10 – 15 phút.
- Quan sát sự phát triển màu hồng – đỏ trong môi trường. Xét nghiệm có thể được đọc trong vòng một giờ sau khi thêm các hóa chất.
- Lưu ý: Nếu kết quả xét nghiệm âm tính (không có màu đỏ) hoặc không rõ ràng, có thể lặp lại xét nghiệm với môi trường đã ủ lại (không thêm hóa chất). Việc ủ lại và kiểm tra lại có thể thực hiện trong vòng 5 ngày
Xét nghiệm Methyl Red
- Sau khi ủ 48 giờ, lấy 2,5mL môi trường lỏng cho vào ống nghiệm sạch.
- Thêm 5 giọt dung dịch Methyl Red vào mẫu.
- Quan sát sự phát triển màu đỏ ngay lập tức trong môi trường

ĐỌC KẾT QUẢ

Xét nghiệm Voges-Proskauer
- Dương tính: Phản ứng dương tính với VP thể hiện bằng sự phát triển màu hồng – đỏ trên bề mặt môi trường từ 15 phút đến một giờ sau khi thêm hóa chất
- Âm tính: Phản ứng âm tính với VP thể hiện bằng sự xuất hiện màu vàng trên bề mặt môi trường. Sự phát triển màu đồng cũng được coi là âm tính
Xét nghiệm Methyl Red
- Dương tính: Phản ứng dương tính với MR thể hiện bằng sự phát triển màu đỏ ổn định trên bề mặt môi trường sau khi thêm chỉ thị methyl đỏ
- Âm tính: Phản ứng âm tính với MR thể hiện bằng sự phát triển màu vàng trên bề mặt môi trường

BacterLab đảm bảo chất lượng của mỗi lô sản phẩm bằng cách kiểm tra với các chủng chuẩn ATCC.

Chủng chuẩn vi sinh vật	Điều kiện nuôi cấy	Kết quả mong đợi
Escherichia coli ATCC 25922	35 – 37°C trong 18 – 48 giờ	MR dương tính (màu đỏ); VP âm tính (màu vàng).
Enterobacter cloacae ATCC 23355	35 – 37°C trong 18 – 48 giờ	MR âm tính (màu vàng); VP dương tính (màu đỏ).

Trong 1L môi trường (tham khảo)

Bufferes peptone	7,0 g
Dextrose	5,0 g
Dipotassium phosphate	5,0 g

pH của môi trường hoàn chỉnh ở 25°C: 6,9 ± 0,2

*Lưu ý: thành phần này mang tính chất tham khảo ngoài ra công ty chúng tôi sẽ pha chế thành phần theo yêu cầu hoặc theo hồ sơ thầu.

Tên Sản Phẩm	Mã Sản Phẩm	Quy Cách
BacterTube™ Methyl Red-Voges Proskauer (MR-VP)	08033	4mL/ ống (50 ống/ hộp) hoặc theo yêu cầu của khách hàng.