BacterStain™ Alcohol Acid

Một dung dịch được sử dụng trong các phương pháp nhuộm vi sinh vật, đặc biệt là trong phương pháp nhuộm Ziehl Neelsen.
Code: 04009
Quy cách: 100mL/chai hoặc theo yêu cầu của khách hàng.
Bảo quản lưu trữ: 18 – 25°C.
Vận chuyển: Nhiệt độ môi trường.
Hạn sử dụng: 24 tháng kể từ ngày sản xuất.

MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG

BacterStrain™ Alcohol được sử dụng trong phương pháp nhuộm Gram để tẩy màu Crystal Violet từ vi khuẩn Gram âm trong khi giữ màu cho vi khuẩn Gram dương. Điều này giúp phân biệt giữa hai loại vi khuẩn dựa trên cấu trúc thành tế bào của chúng.

NGUYÊN TẮC

Trong phương pháp Ziehl Neelsen, alcohol acid (thường là dung dịch ethanol pha với một lượng nhỏ acid HCl) được sử dụng để tẩy màu Carbon Fuchsin từ các vi khuẩn không kháng acid – cồn sau khi nhuộm. Vi khuẩn kháng acid – cồn có khả năng giữ lại màu nhuộm đỏ do thành tế bào đặc biệt của chúng, trong khi vi khuẩn vi khuẩn không kháng acid – cồn sẽ mất màu và được nhuộm lại bằng Methylene Blue, tạo sự phân biệt rõ ràng giữa hai nhóm vi khuẩn này.

Sử dụng trong bộ thuốc nhuộm Ziehl Neelsen

Chuẩn bị tiêu bản:
- Chuẩn bị lam kính sạch, không xước, ngâm vào ethanol 95%, làm khô, sau đó hơ qua ngọn lửa.
- Dán nhãn cho lam kính và đánh dấu vị trí phết bệnh phẩm ở mặt dưới của lam kính.
- Lấy mẫu bệnh phẩm (như đàm, dịch, mô) hoặc khuẩn lạc từ nuôi cấy, ly tâm để thu cặn.
- Sử dụng que cấy vô trùng lấy một vòng ăng (3mm đường kính) hoặc nhỏ một giọt bệnh phẩm lên lam kính. Để lam kính tự khô và cố định bằng nhiệt nhẹ.
Cố định tiêu bản: Để lam kính tự khô trong tủ an toàn sinh học hoặc làm khô ở 60°C.
Nhuộm:
- Phủ thuốc nhuộm BacterStain™ Carbon Fuchsin (Mã: 04004) lên lam kính và hơ 2-3 lần cho đến khi có hơi bay lên (KHÔNG để thuốc nhuộm sôi hoặc khô trên lam kính), để lam kính tự nguội trong 5 phút.
- Rửa nhẹ bằng nước.
- Áp dụng nhiều lần dung dịch BacterStain™ Alcohol acid (Mã: 04009) cho đến khi không còn màu chảy ra từ mẫu.
- Rửa sạch bằng nước và nhuộm đối chiếu với BacterStain™ Methylene blue (Mã: 04006) trong khoảng 1 – 2 phút.
- Tẩy màu bằng dung dịch acid alcohol, rửa kỹ.
- Nhuộm với dung dịch Methylene blue trong 1-2 phút, rửa sạch.
Rửa lại bằng nước, để ráo cho đến khi khô.
Quan sát dưới kính hiển vi, sử dụng vật kính dầu..

ĐỌC KẾT QUẢ

Mycobacterria: màu đỏ/ hồng.
Canh trường còn lại: màu xanh dương
Hình thái AFB từ bệnh phẩm: AFB có hình que mảnh, hơi cong, bắt màu đỏ, đứng riêng biệt hay xếp thành từng cụm, dễ nhận biết trên nền xanh.

BacterLab đảm bảo chất lượng của mỗi lô sản phẩm bằng cách kiểm tra với các chủng chuẩn ATCC.

Chủng chuẩn vi sinh vật	Điều kiện	Kết quả mong đợi
Tiêu bản dương	Quan sát dưới vật kính dầu (100x)	AFB bắt màu đỏ trên nền xanh sáng, không thấy cặn thuốc nhuộm
Tiêu bản âm	Quan sát dưới vật kính dầu (100x)	Không thấy AFB