BacterStain™ Bộ thuốc nhuộm Ziehl Neelsen

Một bộ thuốc nhuộm được sử dụng để phát hiện vi khuẩn kháng acid – cồn.
Code: 04002
Đóng gói thành phần: Alcohol acid; Carbol fuchsin; Methylene blue: 3 chai100 mL/ chai hoặc theo yêu cầu của khách hàng.
Bảo quản và lưu trữ: 18 – 25°C.
Vận chuyển: Nhiệt độ môi trường
Hạn sử dụng: 24 tháng kể từ ngày sản xuất.

MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG

BacterStrain™ Bộ thuốc nhuộm Ziehl Neelsen được sử dụng để nhuộm vi khuẩn để khảo sát tính chất để phát hiện vi khuẩn kháng cồn kháng acid.

NGUYÊN TẮC

BacterStain™ Bộ thuốc nhuộm Ziehl Neelsen dựa trên sự khác nhau về cấu trúc của vách tế bào một số Mycobacteria có một lượng lớn acid mycolic nên khi sử dụng phương pháp nhuộm Gram truyền thống một số vi khuẩn này rất khó bắt màu. Vì vậy, phải sử dụng phương pháp nhuộm kháng cồn kháng acid để quan sát một số vi khuẩn.
Phương pháp nhuộm Ziehl-Neelsen sử dụng hai hoá chất nhuộm màu là carbol fuchsin và xanh methylen kết hợp với chất tẩy màu (hỗn hợp acid-alcohol) để phát hiện một số trực khuẩn kháng cồn kháng acid

Chuẩn bị tiêu bản:
- Chuẩn bị lam kính sạch, không xước, ngâm vào ethanol 95%, làm khô, sau đó hơ qua ngọn lửa.
- Dán nhãn cho lam kính và đánh dấu vị trí phết bệnh phẩm ở mặt dưới của lam kính.
- Lấy mẫu bệnh phẩm (như đàm, dịch, mô) hoặc khuẩn lạc từ nuôi cấy, ly tâm để thu cặn.
- Sử dụng que cấy vô trùng lấy một vòng ăng (3mm đường kính) hoặc nhỏ một giọt bệnh phẩm lên lam kính. Để lam kính tự khô và cố định bằng nhiệt nhẹ.
Cố định tiêu bản: Để lam kính tự khô trong tủ an toàn sinh học hoặc làm khô ở 60°C.
Nhuộm:
- Phủ thuốc nhuộm BacterStain™ Carbon Fuchsin (Mã: 04004) lên lam kính và hơ 2-3 lần cho đến khi có hơi bay lên (KHÔNG để thuốc nhuộm sôi hoặc khô trên lam kính), để lam kính tự nguội trong 5 phút.
- Rửa nhẹ bằng nước.
- Áp dụng nhiều lần dung dịch BacterStain™ Alcohol acid (Mã: 04009) cho đến khi không còn màu chảy ra từ mẫu.
- Rửa sạch bằng nước và nhuộm đối chiếu với BacterStain™ Methylene blue (Mã: 04006) trong khoảng 1 – 2 phút.
- Tẩy màu bằng dung dịch acid alcohol, rửa kỹ.
- Nhuộm với dung dịch Methylene blue trong 1-2 phút, rửa sạch.
Rửa lại bằng nước, để ráo cho đến khi khô.
Quan sát dưới kính hiển vi, sử dụng vật kính dầu..

ĐỌC KẾT QUẢ

Mycobacterria: màu đỏ/ hồng.
Canh trường còn lại: màu xanh dương
Hình thái AFB từ bệnh phẩm: AFB có hình que mảnh, hơi cong, bắt màu đỏ, đứng riêng biệt hay xếp thành từng cụm, dễ nhận biết trên nền xanh.

BacterLab đảm bảo chất lượng của mỗi lô sản phẩm bằng cách kiểm tra với các chủng chuẩn ATCC.

Chủng chuẩn vi sinh vật	Điều kiện	Kết quả mong đợi
Tiêu bản dương	Quan sát dưới vật kính dầu (100x)	AFB bắt màu đỏ trên nền xanh sáng, không thấy cặn thuốc nhuộm
Tiêu bản âm	Quan sát dưới vật kính dầu (100x)	Không thấy AFB

*Lưu ý: thành phần này mang tính chất tham khảo ngoài ra công ty chúng tôi sẽ pha chế thành phần theo yêu cầu hoặc theo hồ sơ thầu.

Tên sản phẩm	Mã sản phẩm	Quy cách
BacterStain™ Bộ thuốc nhuộm Ziehl Neelsen	04002	4 chai 100ml/hộp hoặc theo yêu cầu của khách hàng